文獻(xiàn)里面的熒光照片是用什么燈拍攝的？

經(jīng)常有同學(xué)咨詢，看到文獻(xiàn)里面很多熒光蛋白的照片非常漂亮，不知道怎么拍攝，上海峰志儀器有限公司的技術(shù)工程師將熒光蛋白表達(dá)的拍攝方法給大家說一下，供大家參考。

上圖：紅色熒光蛋白在愈傷上的表達(dá)

熒光蛋白表達(dá)的拍攝工具：

1. 光源：光源用于激發(fā)熒光蛋白發(fā)出熒光，如果視野很大，建議購買LUYOR-3415系列GFP激發(fā)光源，這款照射面積大，激發(fā)熒光亮度高，拍攝效果非常好。

2. 單反相機(jī)：常規(guī)的單反相機(jī)均可。

3. 拍照濾鏡：根據(jù)拍攝的熒光蛋白種類，要選擇合適的熒光蛋白拍照濾鏡，拍照濾鏡是將激發(fā)光源的激發(fā)光過濾掉，讓熒光蛋白的熒光通過，這樣單反相機(jī)就能呈現(xiàn)精美的熒光照片。

4. 暗室：因環(huán)境明亮光線，影響大熒光的拍攝，拍攝周圍光線越暗，拍攝效果約好，如果沒有暗室，可以選擇夜晚拍攝。

熒光蛋白表達(dá)的拍攝技巧：

1. 將單反相機(jī)檔位撥到手動(dòng)檔位（M檔），調(diào)整光圈、ISO、和快門速度三個(gè)參數(shù)到合適值。

2. 將選擇好的熒光蛋白拍照濾鏡安裝到單反相機(jī)鏡頭上。
   

3. 將LUYOR-3415系列GFP激發(fā)光源安裝到臺(tái)式支架上，打開光源開關(guān)。

4. 調(diào)整合適角度，相機(jī)對(duì)焦到拍攝目標(biāo)上，拍攝即可。

說明：

如果是拍攝葉片上的GFP或eGFP的表達(dá)，葉片上的葉綠素在450nm激發(fā)光照射下會(huì)發(fā)出強(qiáng)烈的紅色熒光，如果GFP或eGFP的表達(dá)量不高的話，會(huì)拍攝不到熒光蛋白的表達(dá)，這時(shí)候建議不用LUV-495A拍照濾鏡，用LUV-520A綠色濾鏡拍攝，LUV-520A綠色濾鏡只允許綠色波段通過，葉綠素?zé)晒獗桓綦x掉了。

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