用美國(guó)雙熒光蛋白手電筒檢測(cè)根系中的GFP和DsRED熒光
鱷梨(Persea americana)是一種主要的熱帶水果,與芒果,菠蘿和木瓜一起,約占熱帶水果產(chǎn)量的三分之二。2014年,全球鱷梨產(chǎn)量估計(jì)為502萬(wàn)噸,其中南非貢獻(xiàn)了107176噸。鱷梨生產(chǎn)對(duì)南非具有重要的經(jīng)濟(jì)意義,因?yàn)?014年出口了65845噸鱷梨,總價(jià)值為9.78億蘭特[2]。除了食用之外,鱷梨還被加工成油和鱷梨醬,并且由于營(yíng)養(yǎng)成分高而用于化妝品行業(yè)。南非鱷梨生產(chǎn)中zui重要的生物約束是由卵菌Phytophthora cinnamomi Rands引起的Phytophthora Root Rot(PRR),這是一種病原體,具有超過(guò)3500種植物的廣泛宿主范圍,在上主要鱷梨產(chǎn)區(qū)都發(fā)現(xiàn)[3,4]。PRR影響年齡段的樹(shù)木,包括苗圃中的樹(shù)木,并通過(guò)破壞飼養(yǎng)根部起作用[5,6]。據(jù)報(bào)道,各地的PRR發(fā)病率各不相同,但可能高達(dá)90%,導(dǎo)致果園消失或嚴(yán)重限制水果生產(chǎn)。目前,PRR只能通過(guò)綜合方法進(jìn)行管理,包括使用耐受性砧木和果園管理,如覆蓋和控制灌溉[7]。此外,亞磷酸鹽噴霧劑或樹(shù)干注射劑形式的化學(xué)控制已被廣泛用于控制PRR。
檢測(cè)根系中的GFP和DsRED1熒光
處理后6周,使用美國(guó)雙熒光蛋白手電筒(便攜式熒光蛋白激發(fā)光源)篩選植物根系的GFP和DsRED1表達(dá)。GFP和DsRED1分別用皇家藍(lán)色(激發(fā)440-460 nm,發(fā)射500 nm長(zhǎng)通)和綠色(激發(fā)510-540 nm,發(fā)射600 nm長(zhǎng)通)手電筒進(jìn)行觀察。Adobe Photoshop 5.5用于處理圖像。
文章原文:https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0185896
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熒光手電筒觀察綠色熒光蛋白GFP的表達(dá)
熒光手電筒觀察紅色熒光蛋白R(shí)FP的表達(dá)
上圖:LUYOR-3415RG觀察GFP在大豆根系的表達(dá)
上圖:LUYOR-3415RG觀察GFP在大豆根系的表達(dá)