LUYOR-3415用于棉花基因篩選和視覺(jué)標(biāo)記

作者：上海峰志時(shí)間：2021-04-20 09:44:04瀏覽869 次

信息摘要：

近日，河南大學(xué)在《Front Plant Sci.》期刊發(fā)表文獻(xiàn)《Optimizing the Protein Fluorescence Reporting System for Somatic Embryogenesis Regeneration Screening and Visual Labeling of Functional Genes in Cotton》，文獻(xiàn)中指出利用LUYOR-3415熒光蛋白激發(fā)光源能夠棉花基因的篩選。下面是文獻(xiàn)摘要，文獻(xiàn)全文鏈接在網(wǎng)頁(yè)尾部。

LUYOR-3415RG熒光蛋白激發(fā)光源用于棉花功能基因篩選和視覺(jué)標(biāo)記

近日，河南大學(xué)在《Front Plant Sci.》期刊發(fā)表文獻(xiàn)《Optimizing the Protein Fluorescence Reporting System for Somatic Embryogenesis Regeneration Screening and Visual Labeling of Functional Genes in Cotton》，文獻(xiàn)中指出利用LUYOR-3415熒光蛋白激發(fā)光源能夠棉花基因的篩選。下面是文獻(xiàn)摘要，文獻(xiàn)全文鏈接在網(wǎng)頁(yè)尾部。

蛋白質(zhì)熒光報(bào)告系統(tǒng)對(duì)于深入的生命科學(xué)研究至關(guān)重要，為體內(nèi)微觀生物活性的可視化提供了系統(tǒng)的標(biāo)記工具，并徹底改變了基礎(chǔ)研究。棉花體細(xì)胞再生效率低，造成棉花轉(zhuǎn)化困難。有利于利用熒光報(bào)告系統(tǒng)篩選轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞胚胎。然而，目前棉花中可用的熒光標(biāo)記系統(tǒng)有限。為了優(yōu)化棉花的熒光報(bào)告系統(tǒng)，擴(kuò)大可用熒光蛋白的范圍，我們選擇了11種熒光蛋白，涵蓋紅色、綠色、黃色和青色熒光顏色，并用棉花表達(dá)。除mRuby2和G3GFP外，其他9種熒光蛋白（mCherry，tdTomato，sfGFP，Clover，EYFP，YPet，mVenus，mCerulean和ECFP）在轉(zhuǎn)基因愈傷組織和胚胎中穩(wěn)定而強(qiáng)烈地表達(dá)，并在來(lái)自不同的棉花器官中遺傳自篩選的胚胎。此外，表達(dá)tdTomato的轉(zhuǎn)基因棉花在白光下呈粉紅色，不僅對(duì)愈傷組織、胚胎組織，而且對(duì)成熟植物的各種器官也呈粉紅色，為棉花遺傳轉(zhuǎn)化過(guò)程提供了視覺(jué)標(biāo)記，加速了轉(zhuǎn)基因事件的評(píng)價(jià)。此外，我們?cè)隗w內(nèi)構(gòu)建了表達(dá)mCherry標(biāo)記的轉(zhuǎn)基因棉花細(xì)胞器標(biāo)記物，覆蓋了七個(gè)特定的亞細(xì)胞區(qū)室：質(zhì)膜，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，土著體，線粒體，質(zhì)體，高爾基體和過(guò)氧化物酶體。我們還提供了一種簡(jiǎn)單而高效的策略，使用細(xì)胞器標(biāo)記物快速確定棉細(xì)胞中未表征蛋白質(zhì)的亞細(xì)胞定位。zui后，我們建立了個(gè)使用氣孔特異性表達(dá)啟動(dòng)子（ProKST1，ProGbSLSP和ProGC1）的棉花氣孔熒光報(bào)告系統(tǒng)來(lái)驅(qū)動(dòng)三葉草表達(dá)。本研究中用于轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞胚胎篩選和功能基因標(biāo)記的優(yōu)化熒光標(biāo)記系統(tǒng)為加速體細(xì)胞再生效率和體內(nèi)監(jiān)測(cè)棉花中各種細(xì)胞過(guò)程提供了潛力。

LUYOR-3415用于棉花基因篩選

LUYOR-3415RG激發(fā)光源用于熒光觀察

用變焦立體顯微鏡觀察轉(zhuǎn)基因棉花或煙草表皮細(xì)胞的胚胎愈傷組織，雄蕊，雌蕊，葉和種子組織中的熒光（奧林巴斯，東京，日本）。用共聚焦電子顯微鏡觀察轉(zhuǎn)基因棉花原生質(zhì)體，氣孔細(xì)胞，纖維，葉表皮細(xì)胞和根部樣品中的熒光（尼康，東京，日本）。大于 2 厘米的轉(zhuǎn)基因樣品2使用LUYOR-3415RG手持熒光燈（中國(guó)上海LUYOR）進(jìn)行觀察，并使用EOS 800D相機(jī)（佳能，中國(guó)北京）拍攝圖像，并帶有LUV-495A和LUV-590A熒光拍照濾鏡（LUYOR），用于綠色和紅色熒光觀察。使用濾光片。

LUYOR-3415用于棉花基因篩選